MITOCONDRI - DNA - CILIA
Tecnica di Epifluorescenza per l'evidenziazione simultanea in VIVO di:
Mitocondri, DNA, Proteine.
l metodo, che per semplicità ho chiamato FDR ha diversi vantaggi:
- E' molto economico dato che prevede l'utilizzo di fluorocromi tradizionali di facile reperibilità e di basso costo rispetto alle moderne sonde molecolari (naturalmente indispensabili per lavori di ricerca avanza
- Utilizza una miscela calcolta di Fluorocromi tradizionali la cui concentrazione è tale da minimizzare il la tossicità e massimizzare il contrasto tra i colori dei bersagli:
- Prevede l'uso di un'unica sorgente luminosa in grado di eccitare contemporaneamente i tre fluorocromi che emettono a tre diverse lunghezze d'onda.
- E' molto semplice e veloce (si ottiene il risultato già dopo 15 minuti di incubazione a T.A.)
- Offre risultati stabili e riproducibili e permettere l'analisi in fluorescenza anche dopo molte ore dopo il trattamento del campione in esame.
Cellule Ciliate della cavità nasale
Il DNA si colora i Rosso Arancione
I Mitocondri in Giallo
Le Proteine delle cilia in Verde ( vedi anche foto di copertina )
NUCLEOIDI Mitocondriali
L'elevata specificità del Dimidio Bromuro (da usare con qualche precauzione essendo un Intercalante del DNA) permette l'evidenziazione del DNA Mitocondriale ad esempio nei Nucleoidi dei mitocondri in cellule di lievito.
Questa proprietà è molto utile e permette di ottenere risultati in alcuni casi confrontabili con quelli ottenibili in microscopia confocale se si adotta la giusta attenzione durante la preparazione del campione.
Mitocondri in cellule di Rodotorula Glutinis
Sono ben visibili i Nucleoidi come punti rossi lungo i mitocondri colorati in giallo.
